试剂配置

A：0.5_~1%的伊红酒精溶液：

称取伊红Y 0.5_~1 g，加少量蒸馏水溶解后，再滴加冰醋酸直至浆糊状。以滤纸过滤，将滤渣在烘箱中烤干后，以95%酒精（即工业酒精，如果不怕浪费，用无水乙醇配制也可）100毫升溶解。

B：苏木素染液配方：(配制3000 ml，可按比列减少)

苏木精6 g

无水乙醇100 ml

硫酸铝钾150 g

蒸馏水2000 ml

碘酸钠1.2 g

冰醋酸120 ml

甘油900 ml

配制方法：将苏木素溶于无水乙醇，再将硫酸铝钾溶于蒸馏水，溶解后将甘油倾入一起混合，最后加入冰醋酸和碘酸钠。

C：1%盐酸酒精分化液：将1毫升浓盐酸加入99毫升70%酒精中即可。

染色流程

(1)二甲苯（Ⅰ）15min

(2)二甲苯（Ⅱ）15 min

(3)100%乙醇（Ⅰ）5min

(4)100%乙醇（Ⅱ）5 min

(5)80%乙醇5min

(6)蒸馏水5 min

(7)苏木精液染色5 min

(8 )流水稍洗去苏木精液1-3 s

(9) 1%盐酸乙醇1-3 s

(10)稍水洗10-30 s

(13)蒸馏水过洗1-2 s

(14) 0.5%伊红液染色1-3 min

(15)蒸馏水稍洗1-2 s

(16) 80%乙醇稍洗1-2 s

(17) 95%乙醇（Ⅰ）2-3 s

(18) 95%乙醇（Ⅱ）3-5 s

(19)无水乙醇5-10 min

(20)石炭酸二甲苯5-10 min

(21)二甲苯（Ⅰ）2 min

(22)二甲苯（Ⅱ）2 min

(23)二甲苯（Ⅲ）2 min

(24)中性树胶封固

注：①第（10）、（11）步可省去，（12）步冲水时间需延长至20-30min。

②第（20）步如果不用石炭酸二甲苯，可改用无水乙醇。

*冷冻切片HE染色步骤：

（1）冰冻切片固定10～30 s

（2）稍水洗1～2 s

（3）苏木精液染色（60℃）30～60 s

（4）流水洗去苏木精液5～10 s

（5）1%盐酸乙醇1～3 s

（6）稍水洗1～2 s

（7）促蓝液返蓝5～10 s

（8）流水冲洗15～30 s

（9）0.5%曙红液染色30～60 s

（10）蒸馏水稍洗1～2 s

（11）80%乙醇1～2 s

（12）95%乙醇1～2 s

（13）无水乙醇1～2 s

（14）石炭酸二甲苯2～3 s

（15）二甲苯（Ⅰ）2～3 s

（16）二甲苯（Ⅱ）2～3 s

（17）中性树胶封固。

注：第（14）步如果不用石炭酸二甲苯，可改用无水乙醇。

染色结果 ：细胞核蓝色，胞质、肌纤维、胶原纤维和红细胞呈深浅不一的红色。

4．12切片脱水透明 切片经HE染色后，要彻底脱水透明，才能用中性树胶封盖。如果脱水不彻底，封片后呈白色雾状，镜下观察模糊不清，且容易褪色。切片1-2级无水乙醇脱水，也可使用石碳酸二甲苯进行脱水。石碳酸有较强脱水能力，但长时间可使切片脱色，因此要经过多次二甲苯以使石碳酸完全除去。